尊龙凯时推出了一款基于探针法荧光定量PCR原理的检测试剂盒,具备以下独特特点:
产品概述
该产品的设计非常便捷,用户只需提供样品DNA模板即可立即使用。
产品特点
- 即开即用:用户只需准备样品DNA模板,无需复杂的准备过程。
- 高灵敏度:经过优化的引物等组分提供了优异的灵敏度响应。
- 阳性对照:提供阳性对照样品,帮助区分假阴性结果。
- 高特异性:引物设计针对中间普雷沃菌DNA序列的高度保守区,确保不会与其他生物样本的DNA发生交叉反应。
- 功能多样:可进行定性和定量检测,定量检测时线性范围达到至少5个数量级。
- 监管合规:本产品可支持50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
- 科研使用:仅限科研用途。
使用方法
一、样本准备
使用选定的方法提取和纯化DNA样品,本试剂盒与市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。
二、稀释标准曲线样品
注意:由于阳性对照浓度较高,稀释时请在独立区域进行,以避免样品污染。
- 标记六个离心管,分别命名为7、6、5、4、3、2。
- 在各管中加入45μL DEPC-H2O,建议使用带芯的枪头。
- 在7号管中加入5μL的阳性对照液,充分震荡后冷藏备用。
- 依次用上述稀释的阳性对照液再次稀释,以得到所需的标准曲线样品。
三、试剂配制
针对N个待检样品,准备N+2个qPCR管(包含1个阴性对照和6个阳性对照),并将所需试剂加入各个PCR管中。
四、添加模板
向PCR管中加入2μL模板,顺序为阴性对照(DEPC-H2O)、待测样品模板及阳性对照,离心30秒后立即进行扩增反应。
五、扩增反应
将PCR管放入PCR仪器样品槽,执行扩增程序,美好的检测结果即将呈现。
六、结果分析
若制作标准曲线,需要根据阳性对照浓度的log值和Ct值绘制标准曲线,推算样品DNA浓度。
如未制作标准曲线,可根据Ct值进行结果判定:
阳性对照:Ct值<30,呈现明显的S型曲线;
阴性对照:Ct值≥38或无Ct值;
样本结果:Ct值<35为阳性,Ct值在35-38范围需复检。
运输及保存
请将试剂在低温条件下运输,并于-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需独立存放以避免污染其他试剂。
选择尊龙凯时的检测试剂盒,助力您的生物医疗科研,确保实验精确、高效。