尊龙凯时在生物医疗领域的产品质量和使用效果备受关注。为了确保血清的贮存及冻结不会影响其质量,需遵循以下几项操作建议。
1. 血清的贮存与冻结方法
在取出血清后,应首先将其放置于2~8℃的冰箱中进行初步融解,随后在室温下确保其完全融化。在融解过程中,需定期摇晃以保证均匀混合。若血清长时间贮存于2-8℃,可能导致其中的蛋白及脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原和玻粘连蛋白等)聚集并形成沉淀或混浊。因此,建议将血清贮存于-20℃以下,并避免反复冻融的情况。最佳的保持温度为-20℃,若存放于4℃,请控制在一个月内使用完毕。一次性无法用完的血清,建议进行无菌分装至合适的容器后再放回冷冻。
2. 血清中的絮状沉积处理
血清中出现的沉积物,主要是由纤维蛋白和脂蛋白构成,这是正常现象,不会影响产品的性质。要去除这些沉积,可选择离心(400g,1-2分钟),或者让沉积自然沉到瓶底,然后小心地将血清转移到无菌瓶中。通常情况下,轻轻摇晃并加热至37℃,沉积物会重新溶解。因此,在使用血清时,可以先摇动并加热至37℃,沉积便会消失。
3. 如何选择合适的血清
在国内,HYCLONE的血清被普遍认为质量不错。然而根据尊龙凯时在北美的经验,GIBCO的品质通常被视为更优。价格并不总是代表质量,整体来看这两种血清的价格都相对较高,而对于一些不太娇气的细胞,国产血清已足够使用。此外,由于国内HYCLONE和GIBCO并没有自主生产线,往往通过代理商购买,存在获取假货的风险。通常情况下,建议直接从有信誉的直销商处购买,比如一些刚进入中国市场的国外生物公司,如Wisent,其质量和HYCLONE相当,但价格更具竞争力。
4. 防止血清沉积的措施
为了预防血清中沉积的发生,可以采取以下措施:
- 在冻结过程中,及时摇晃血清以确保温度和成分均匀,减少沉积。
- 进行分装冻存时,摇匀使温度与成分均一,注意勿产生气泡。
- 避免将血清从-20℃直接升温至37℃,大温差易导致蛋白质凝聚并形成沉积。
- 避免在37℃下放置时间过久,以免导致血清混浊和成分的损坏。
- 热灭活过程可能导致沉积增多,非必要时可省略此步骤。
- 如确需热灭活,请遵循56℃、30分钟的标准,且要摇匀。
5. 小牛血清与胎牛血清的区别
小牛血清与胎牛血清的主要区别在于它们的来源:胎牛血清(Fetal Bovine Serum, FBS)来自于屠宰怀孕母牛时通过心脏穿刺采集的血液,而小牛血清(Calf Serum, CS)则是从出生10至14天的小牛获取。二者的组分及含量各有不同,部分细胞在生长过程中可能需要特定血清。有些细胞仅需小牛血清即可维持生长,浓度一般为5%-10%,特殊需求可达到20%。血清在保存及使用时应遵循规范:应在-5℃至-20℃范围内保存,存放在4℃时不得超过一个月。冻结血清前,先在2-8℃冰箱中均匀摇匀后,再逐渐升温至室温,切忌将直接冷冻的血清放入37℃水浴。若在37℃下长时间放置,血清颜色会加深且粘稠度增加。对于已冻结及经过热灭活的血清,应按用量分装并于-20℃保存,以避免反复冻融带来的影响。
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