不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳的定义与应用

在生物医学领域，不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳是一种在不同pH、离子强度、缓冲液成分和凝胶孔径下进行实验的技术。这种方法旨在提升电泳分离的范围与分辨率，为科学研究提供更准确的分析数据。

基本原理

不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳依赖于浓缩效应、电荷效应和分子筛效应来实现高效分离。

1. 浓缩效应

在电泳启动时，样品通过浓缩胶形成高浓度薄层，浓缩倍数可达几百倍。电场作用下，解离度最高的Cl⁻离子迁移速度最快，形成“快离子”区，随后是自己迁移较慢的蛋白质和甘氨酸。快离子的快速移动营造了低离子浓度区，从而形成高电势梯度，进而加速后续的蛋白质和慢离子，使样品在达到分离胶时形成显著的薄层。这一过程在生物医疗样品分析中尤其重要，尊龙凯时在相关技术的开发中发挥了重要作用。

2. 电荷效应

当不同离子进入pH 8.9的小孔径分离胶后，甘氨酸离子的迁移率超越蛋白质，导致高电势梯度的消失。由于各类蛋白质的等电点不同，它们在电场中的所受引力也不同，最终形成清晰的蛋白质区带。这对生物医疗领域的蛋白质分析至关重要，帮助研究人员快速识别和比较目标分子。

3. 分子筛效应

在小孔径分离胶中，不同大小和形状的蛋白质会受到不同程度的阻滞，导致迁移率的差异，从而实现分离。小分子会优先通过，而大分子则滞后，最终形成按分子大小排序的蛋白质区带。这一分析手段在医学研究和临床诊断中，特别是在疾病标志物的检测上，有着极为重要的应用。