尊龙凯时的哺乳动物蛋白提取试剂盒包含以下成分：5X缓冲液10ml、5X盐溶液10ml、5X十二烷基硫酸钠（SDS）10ml、5X脱氧胆酸钠（DOC）10ml、5X NP-40 10ml以及20X磷酸盐缓冲盐水（PBS）10ml，另附有0.5ml的蛋白酶抑制剂混合物。该试剂盒可在常温下储存，惟独蛋白酶抑制剂混合物应在-20°C保存，保质期为24个月。

提取步骤如下：

1. 准备阶段

依据5X缓冲液、5X盐溶液、5X SDS、5X DOC及5X NP-40，以1:1:1:1:1的体积比（v/v）制备细胞裂解缓冲液。每1ml细胞裂解缓冲液适用于提取106至107个细胞或5至20mg的组织。在使用前，需加入10μl的蛋白酶抑制剂混合物。

2. 细胞或组织的洗涤和处理

a. 对于贴壁细胞：去除细胞培养基，用PBS缓冲液冲洗细胞两次。接着加入细胞裂解缓冲液（106~107个细胞/ml），将细胞完全浸入冰袋中，并在摇床上孵育30分钟，期间可周期性重悬细胞，最后收集裂解液。

b. 对于悬浮细胞：在700xg下离心5分钟并去除上清液。用PBS重悬细胞并进行两次洗涤，接着在4°C下离心并去除上清液。将沉淀重悬于细胞裂解缓冲液（106~107个细胞/ml），并置于冰袋中，在摇床上孵育30分钟。

c. 对于组织样本：将组织切成小块，并用PBS冲洗两次。加入细胞裂解缓冲液（5~20mg组织/ml），将样品转移至预冷的微量匀浆器中，在冰上进行30~50次均质化，确保目标蛋白的功能完整性。然后在34°C下以12,000xg离心10分钟，以沉淀细胞碎片，或者进行高转速离心（100,000xg离心45分钟）以制备蛋白质溶液。

3. 收集蛋白质上清液

将含有蛋白质的上清液移至冷冻管中。可以在冰上保存以便立即使用，或将蛋白质溶液存放于-70°C中，方便后续实验使用。

通过使用尊龙凯时的哺乳动物蛋白提取试剂盒，研究人员可以高效、便捷地获得高质量的蛋白质样本，有助于推动生物医学研究的进展。