尊龙凯时品牌的研究表明，癌症细胞通过代谢重编程实现生存适应，了解药物对代谢通路的影响对于新疗法的开发至关重要。本研究结合细胞水平的代谢通量分析与分子水平的代谢组学/脂质组学技术，深入探讨两种酪氨酸激酶抑制剂——AG-879和SU1498——对白血病细胞（THP-1）代谢的调控机制。

方法与技术

1. 细胞代谢分析：使用Seahorse XF Pro实时监测线粒体呼吸（OCR）与糖酵解（ECAR），评估ATP生成速率、质子漏（Proton Leak）和线粒体备用呼吸能力（SRC）。药物处理方面，将AG-879和SU1498分别作用于THP-1细胞，时间设置为2小时和18小时，以观察急性与长期代谢效应。

2. 分子代谢分析：样本通过Bravo自动化平台进行代谢物与脂质的双相提取，并结合HILIC（极性代谢物）与反相色谱（脂质）分离。利用Agilent Revident系统进行非靶向代谢组学与脂质组学分析，配套使用MassHunter软件进行数据解析与注释。

注意：细胞数目的归一化非常重要，NovoCyte Quanteon搭配自动上样器Q确保后续细胞与分子代谢分析的多孔板实验的可靠性。

关键发现

1. 线粒体功能与代谢适应方面，AG-879导致线粒体解偶联（质子漏随时间增加），并完全失去SRC，表明细胞适应能力受到限制。而SU1498则在短期内显著增加质子漏，长期则下降并降低SRC，显示细胞通过下调TCA循环来应对代谢压力。同时，两种药物均抑制线粒体ATP生成，迫使细胞依赖糖酵解进行补偿（GlycoATP上升）。

2. 在代谢组学与脂质组学方面，SU1498显著改变了多种代谢物，其中糖酵解中间体减少（如磷酸戊糖途径代谢物），与GlycoATP升高相一致。同时，嘌呤代谢物（如尿苷、肌苷）增加，表明代谢重编程在支持核酸合成方面的重要性。此外，甘油三酯（TG）显著积累，可能通过回补反应将乙酰辅酶A转化为能量储存脂质，含多不饱和脂肪酸（PUFA）的磷脂酰肌醇（PI）也有所增加，可能影响癌细胞的信号通路。而AG-879的影响相对较弱，仅有少数代谢物与脂质显著变化，可能与SRC的完全丧失相关。

结论

通过将细胞功能与分子组学数据结合，该研究揭示了单一技术难以发现的代谢适应机制，例如SU1498通过TG的积累和PUFA-PI的重塑来应对代谢压力。线粒体解偶联与脂代谢重编程可能成为癌细胞耐药性的新靶点，为联合疗法的开发提供新的思路。

该工作流程为药物代谢机制研究提供了一套标准化方案，适用于抗癌药物筛选、毒性评估及个性化医疗中的代谢标志物发现。更多详细信息请访问尊龙凯时官方网站。